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关于胚胎您想知道的都在这里
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关于胚胎您想知道的都在这里

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本文于468天前发布   468天前更新
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最近很多人问我关于胚胎的一些问题,我就干脆逮住了诊所的胚胎实验室主任——Dr. Carlos.Guerrero,做了一个专访!给大家全面介绍一下关于胚胎的知识和常见问题。

Dr. Guerrero是咱达村胚胎学家协会创始人兼CEO,在诊所(Fertility Specialist of Texas)建立了自己独立的胚胎实验室团队。这个团队主要是由高级胚胎学家(Senior Embryologist),初级胚胎学家(Junior Embryologist),男科学家(Andrologist)组建。除了圣诞节,实验室24小时都会有人工作,负责操作卵子和精子,培育健康的胚胎。

Part 1 取卵后都发生了什么

在取卵之后,患者的卵子将立刻被送到与手术室一墙之隔的胚胎实验室内,由胚胎学家接手。接下来会发生什么呢?

取卵后都发生了什么——版权属于FST诊所

1. 清洗卵子和精子

胚胎学家会立刻对卵子进行清理,统计出一共取得了多少颗卵子并在患者麻醉醒来后告知患者夫妇。

与此同时,丈夫需提交新鲜采集的精子。如有特殊情况,例如男方无法到场,或是使用的捐赠精子,我们会在这时解冻提前冷冻好的精子。

新鲜的精液送达实验室后,我们的工作人员会使用特殊的媒介将精液进行洗涤,以取得最强壮的精子。

以下是三种常用的精子清洗技术。

图片来自网络——版权属于作者

a. 简单精子洗涤法

将精液与一种由抗生素和蛋白质补充剂组成的特殊溶液混合并放入试管中,进行稀释。然后把试管放在离心机里,这是一台以极高的速度旋转的机器。当精子混合物被旋转时,精子细胞会沉降到试管的底部,产生大量密集的、高度活跃的精子。这些精子随后可以从试管中取出并用于合成受精卵。一个简单的精子清洗大约需要20到40分钟。

 

b. 精子上游法

在美国的IVF诊所里,精子上游法正变得越来越流行。这项技术围绕着这样一个理念:精子需要向前游,向上游才能到达子宫。只有最强壮的精子才能做到这一点。为了找到这个强壮的精子,精液被放在培养皿中,培养皿中有一层培养基。精子会被这种培养基吸引,并游向它。当精子游向培养液,实验人员将会把这些精子进行收集。这项技术需要大约两个小时来收集足够的精子用于合成受精卵。

 

c. 密度梯度离心法

这是目前诊所使用最多的洗精方法之一。密度梯度离心法利用了精液中各个成分沉降系数的不同,可以从取得的精液中分离出死去的精子细胞、白细胞和其他废物。精液首先将被放在媒介液体的最上层,试管在离心机中旋转。当它旋转后,活跃的、健康的精子会进入试管中最底部的液体层,而碎片和死去的精子会被夹在最上面的两层。为了从试管中取出活跃的精子,这些层可以被过滤掉。取得的健康精子随后被用于合成受精卵。使用密度梯度离心法洗涤精子大约需要60分钟。

洗精不仅可以筛选出最强壮、最具活力的精子,还可以去除存在于精液中间的病毒。例如:HIV、乙肝、丙肝、梅毒等。目前美国的精子洗涤技术已经相当成熟,精子不携带任何的传染性病毒的概率几乎可以达到99%。因此,在辅助生殖的过程中,精子洗涤是非常重要的一个环节,这不仅可以提取出最健康的精子,又能避免一些遗传疾病的延续,从而提高授精率,达到优生优育的目的。

通过洗涤和筛选的精子样本将会被转移到放卵子培养皿中,进行授精。

2. 授精

授精的方法有两种:常规授精和ICSI(卵母细胞浆内单精子注射)

  • 常规授精:即是将精子和卵子混合在一起,让他们自然授精。这个方法适用于精子质量高,数量较多的男性。
  • ICSI卵母细胞胞浆内单精子注射:我们将选择一颗单精子,在高倍显微镜的观察下,使用玻璃针管固定卵子,将精子注射入卵子内部,进行授精。最后放入培养箱中进行培育。这个方法适用于精子数量不佳,或是担心自己质量不够好的男性。

ICSI 单精子显微注射——版权属于FST诊所

这一操作将在取卵当日完成,这也被称为是胚胎培养的第0天。

3.胚胎培养

胚胎完成授精之后,将被放入专门的胚胎孵化器中,继续培养。

胚胎孵化箱——版权属于FST诊所

取卵后的第二天,即胚胎发育的第1天,也是确认授精的日子。

在早上,胚胎学家将评估精子和卵子DNA,取得卵子该日的生长结构,从而确认是否正常授精。

诊所的护理协调员会在当天打电话告知病人有多少卵子成功授精。

在这之后,胚胎学家们会将胚胎放入特殊的媒介当中持续培育这些胚胎,直到胚胎发育的第5-6天。媒介中包含了所有胚胎发育过程中所需要的营养物质。

通常一颗健康的胚胎,发育到第三天,应该可以分裂出6-8颗细胞,而且大小一致。

Day 3 胚胎——版权属于FST诊所

 

发育到第五至第六天,胚胎可以达到囊胚状态。囊胚状态是比较难到达的。这时,胚胎将拥有超过100颗以上的细胞,我们可以从这些显微照片中清楚的分辨出宝宝以及胎盘。

Day 5/6 胚胎——版权属于FST诊所

胚胎学家将会在胚胎发育的第3天以及第5-6天评估胚胎发育的情况,并打电话告知患者。

4. PGS/PGD

在胚胎发育到囊胚状态的时候,患者可以选择是否将胚胎送去进行PGS/PGD筛查,以确保这将是一个健康的宝宝,提高着床的成功率。

这一天,我们的胚胎学家将用针管固定住胚胎一侧(避开宝宝的细胞组织),用另一根针管吸取囊胚外层细胞(胎盘部位)的3-4颗细胞,进行切割,并制作成切片样本,送去专门的PGS实验室进行检验。

囊胚活组织取样(Biopsy)——版权属于FST诊所

PGS是移植前染色体筛查,是对23条染色体进行分析,某条染色体上是否有平衡易位,单倍体,三倍体等,避免染色体变异造成得胎停等问题。

PGD是移植前基因诊断,主要是对已知的家族性基因基因遗传疾病进行基因诊断,如果没有疑似的家族遗传疾病就不需要做PGD。

通常如果没有家族遗传病史的患者家庭,只需要进行PGS即可。

PGS和PGD做完就可以知道宝宝性别!

PGS(染色体筛查)异常的胚胎,我们这里是绝对不会植入的!染色体异常的胚胎,不仅是成功率低,还极有可能对孕妇造成很大的妊娠风险,就算能成功生产,宝宝也极有可能存在缺陷。如果医生在明知胚胎有染色体异常,还为病人进行了植入,一旦病人由于染色体胚胎异常的因素,导致身体健康受到危害,进行起诉,医院将承担难以估计的风险。所以通常诊所都不会这么做。

5. 胚胎冷冻

在胚胎完成切片的同时,整个胚胎将被冷冻.

Part 2 胚胎如何冷冻和解冻

胚胎如何解冻和冷冻——版权属于FST诊所

每个诊所的规定不同,在FST,我们的常规操作是所有的胚胎需达到囊胚状态,才能进行冷冻。囊胚状态的胚胎即培育了5-6天的胚胎。

囊胚状态下的胚胎,拥有了超过100颗以上的细胞,这时候的细胞非常的小,所以会较容易冷冻。FST采用的是目前最先进的玻璃化冷冻法(Vitrification),这是一种非常快速的冷冻方法。

冷冻胚胎——版权属于FST诊所

我们会使用特殊的高浓度的冷冻保护剂,在极短时间内替换掉细胞内的水分并达到平衡。这时,细胞由于脱水而体积缩小到原体积的50-70%。然后将胚胎放入液态氮中,进行快速降温(约2000℃/分钟),使细胞呈现介于液体和固体之间、一种不规则类、似玻璃的状态。

玻璃化冷冻法可以有效的防止任何冰晶的生成,胚胎在这个过程中不会有任何损害,从而获得非常高的着床率和活产率。

冷冻后的囊胚——版权属于FST诊所

冷冻后的胚胎,将会在零下196℃的液氮冷藏罐中保存,并可以无限期的储存下去。

冷冻的储存罐——版权属于FST诊所

胚胎解冻的方式也是相同的。非常的快速,不会对胚胎造成任何的伤害。

Q&A——常见问题:胚胎的等级如何定义

胚胎的等级如何定义——版权属于FST诊所

在美国,定义胚胎的等级,通常有两个不同的体系:

  • 一个是培育3天的胚胎,即3日胚胎(Day 3 Embryo)
  • 一个是培育5/6天的胚胎,也就是囊胚(Blastocyst )

三日胚胎评级 —— Day 3 Embryo

对于培育3天的胚胎评级,这个相对比较简单。我们通常会根据细胞的数量来进行评级。

3日胚胎的分数是从1到5,1是最好的分数,5是最差的分数。

1分的三日胚胎,会拥有6-8颗细胞,每一颗细胞都是同样的大小,胚胎内部有任何的碎片。这也是最理想的胚胎状态。

培育3天的1级胚胎——版权属于FST诊所

 

5分的胚胎,只有少于6颗的细胞,也许是3颗细胞,或是根本没有细胞。胚胎四周有许多的碎片。这个等级的胚胎,通常都会因为无法继续发育而直接被淘汰掉。

培育3天的5级胚胎——版权属于FST诊所

囊胚评级 —— Blastocyst 

就我所在的诊所,我们通常都会移植囊胚,囊胚也是我们唯一会冷冻和解冻的胚胎。因此最重要的就是对囊胚进行评级。

针对囊胚,我们会通过观察细胞的密度,来评估囊胚腔内部的细胞——也就是将会发育成宝宝的细胞;囊胚腔外部的细胞——将会发育成为胎盘的细胞;以及囊胚腔。根据细胞分裂的情况,以及囊胚腔中碎片的比例,共有3个评级标准,分别是:

  • 宝宝——内细胞团(Inner Cell Mass —— ICM)
  • 胎盘——滋养细胞层(Trophoblast —— TE)
  • 囊胚腔(Blastocele)

等级从A到F,A是最好的,F是最差的。

A级的胚胎,有非常多的宝宝细胞,非常多的胎盘细胞,和干净无杂质的囊胚腔。

AAA级囊胚——版权属于FST诊所

 

F级的胚胎,没有任何的宝宝细胞,只有极少的胎盘细胞,没有或是只有非常小的囊胚腔。

FFF级囊胚——版权属于FST诊所

胚胎的等级越高,当然成功率也会更高。FFF级别的胚胎,并不意味着就不能发育成一个健康的宝宝,只是概率更低。至少在FST,我们有过植入低分胚胎,并成功着床诞生的先例。

Q&A——常见问题:鲜胚 OR 冻胚

我们应该移植鲜胚还是冻胚?答案非常简单!我们应该尽量选择移植冻胚!因为冻胚的着床率,以及妊娠率更高!

鲜胚 OR 冻胚——版权属于FST诊所
  • 鲜胚是指培育了3天的胚胎,这时候的正常胚胎,结构非常简单,大概有6-8颗细胞,无法进行PGS/PGD筛选,也无法得知性别。
  • 冻胚通常是指囊胚,也就是培育了5-6天的胚胎。这时候胚胎已经具备宝宝和胎盘的雏形,拥有100颗以上的细胞,结构稳定,可以切取3-4颗外周滋养层细胞进行PGS/PGD, 进而筛选出最健康的胚胎,避免遗传病,并获知宝宝性别。

不论是鲜胚,还是冻胚,患者使用的促排药物都是相同的,区别在于鲜胚移植,是让患者的子宫内膜以一种更自然的方式来接手胚胎。鲜胚移植同样会有很好的妊娠率,但患者有可能会出现例如孕酮过高,子宫内膜厚度不够好等问题,因此着床率会较低。 患者也许需要增加移植胚胎的数量来获得好孕,但这同时,也曾加了妊娠的风险。

冻胚移植,需要再进入一个FET疗程(Frozen  Embryo Transfer)也就是胚胎冷冻、解冻、移植的过程。在这期间,患者需要在下一个月经周期到来后,给诊所打电话,确认开始服用口服避孕药,并按照制定疗程计划,以及实验室测试结果进行用药,让子宫内膜的厚度达到8mm、并补充注射一定剂量的黄体酮,让子宫达到最适宜胚胎着床的环境水平。这段时间,也可以让患者在经历了促排取卵之后,有至少一个月的时间,好好休息,调理好身体循环,让患者身心都能做好准备迎接孕育一个宝宝。

过去的问题是,冷冻和解冻胚胎的技术并不够好,但是如今,就我们的实验室来说,已经可以100%保证胚胎的存活率。

因此基于100%的冻胚存活率,冻胚和鲜胚的质量是一样的,我们可以完全用冻胚替代鲜胚,以达到更高的成功率,让患者拥有一个理想的健康宝宝。

Q&A——常见问题:Day 3 OR Day 5

3日胚胎 OR 5日胚胎——版权属于FST诊所

这个问题其实和上一个问题类似。至少在我们诊所,可以直接理解为:

  • Day 3 = 培育3天的胚胎 = 鲜胚

  • Day 5 = 培育5-6天的胚胎 = 囊胚 = 冻胚

答案不言而喻了吧! 选择Day 5,囊胚植入,成功率更高!

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更多问题,欢迎在下方给我留言,我会尽力为大家解答!

祝愿大家都能有一个健康的宝宝~~

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